Токсические и терапевтические факторов на лабораторные показатели. Анализ мочи по Зимницкому
Диагностические и лечебные мероприятия могут оказывать влияние на полученные результаты. Неучтенное влияние этих факторов может исказить смысл лабораторной информации.
Венепункция - оказывает определенное психологическое и физическое воздействие на человека с повышенной чувствительностью к боли или с психической лабильностью и стать, тем самым, стрессом для обследуемого, вызвав повышенное содержание адреналина в крови.
Введение мочевого катектера - может повысить и активность кислой фосфатазы в крови, что иногда приводит к неоправданному предположению об опухоле предстательной железы.
Необходимо учитывать влияние различных лечебных мероприятий по лабораторным показателям, тем более, что эти воздействия могут быть весьма значительны.
физические (включая до электрического тока высокого напряжения);
химические (лекарственные препараты);
биологические (введение вакцин, сывороток);
Так, например, лечение введением АТС - стимулирует секрецию гормонов коры надпочечников, что ведет к изменениям показателей азотного обмена, повышение уровня глюкозы вследствие глюконеогенеза, усилением липолиза и повышением содержания НЭЖК в крови.
Изониазид, метилдофа, сульфаниламида - повышают содержание билирубина в сыворотке крови.
Ацетилсалициловая кислота при лечении ревматизма ведет к повышению активности АлАТ.
Фармакологическое действие лекарств на лабораторные показатели может зависеть от дозы и длительности применения препаратов, от индивидуальной чувствительности к ним пациента.
Действие лекарства или его метаболитов выявляется во время лабораторного исследования, т.е. ее можно воспроизвести, добавляя лекарства к пробе сыворотки крови или другой биологической жидкости.
Биологические и другие факторы
Среди биологических факторов можно выделить категорию тех, которые следует учитывать, но изменить которые не в состоянии. Это проще всего
постоянно действующие факторы - расовые, национальные, т.е. в конечном счете генетически обусловленные.
факторы, оказывающие длительное физиологическое воздействие - пол, возраст, тип сложения, привычную физическую активность, цикл и характер питания, связанные с национальными и местными традициями, обычаями, условиями.
факторы внешней среды - географические, климатические, время года, особенности пищевых продуктов в среде привычного обитания, обусловленные составом почвы, воды, а также социальные факторы.
генетические факторы способны изменять лабораторные показания концентрации свободного холестерина, ЛПВП, ЛПНП зависит в большей мере от генетических факторов, чем от факторов среды.
В зависимости от возраста люди четко делятся по характеру лабораторных показателей на четыре группы:
Новорожденные
Взрослые
Пожилые люди
Физиологические кратковременные вариации могут быть регулярными или случайными.
Регулярные - наблюдаются в течение 24-часового периода (так называемые суточные ритмы). Известны суточные ритмы колебания содержания электролитов, стероидов, фосфатов и воды в моче. Диагностически важны суточные колебания в содержании кортизола в плазме. Для ограничения влияния суточной вариации на результаты анализа нужно брать пробы в одно и то же время дня (преимущественно рано утром и натощак).
Физическая нагрузка вызывает сдвиги значения активности ферментов, что необходимо учитывать при обследовании амбулаторных больных.
Концентрация белка плазмы варьирует в зависимости от положении тела (в положении лежа она ниже, чем в положении стоя). При различных положениях тела меняется также содержание калия, кальция, альбумина, АсАТ, кислот и щелочей, фосфатов, фосфора и холестерина.
Ряд физиологических факторов может оказать влияние на результаты лабораторных исследоьаний. Часть из них способна вызывать реальные отклонения лабораторных результатов от референтных значений вне связи с патологическим процессом.
К числу таких факторов относятся:
Возраст пациента;
Его пол;
Беременность;
Время дня, в которое брали пробу.
Так, с возрастом в крови снижается концентрация гормонов надпочечников (андростендион), соматотропного гормона и увеличивается уровень мочевины. Беременность может изменять результаты определения гормонов щитовидной железы. Концентраиия железа в крови существенно колеблется в течение дня.
Профессионалы [ые и бытовые токсичные вещества (этанол, никотин, наркотики;, диагнос гические и лечебные процедуры, л екарез венные средства могут также оказывать влияние на результаты лабораторных тестов.
Аналитическая вариация (разброс результатов), зависящая от применяемых в лаборатории методов и условий их выполнения, расширяет пределы референтных значений и этим ограничивает возможность по лабораторным тестам различать здоровье и болезнь. Например, аналитическая вариация метода определения глюкозы крови для диагностики сахарного диабета не должна превышать 7,8%. Поэтому портативные глюкометры на тестовых полосках, аналитическая вариация у которых составляет 15%, не должны использоваться для диагностики сахарного диабета у пациентов. Ведь если истинная концентрация глюкозы в крови у пациента составляет 8 ммоль/л, то глюкометр может показать результат от 6,8 до 9,2 ммоль/л, но 6,8 ммоль/л - это нормальное значение. Расчет проводится следующим образом: 8 ммоль/л. 15%/100% = ±1,2 ммоль/л; 8 ммоль/л ± 1,2 ммоль/л = 6,8-9,2 ммоль/л.
В табл. 1-12 приведены максимально допустимые пределы аналитической вариации (разброса) анализируемых компонен гов.
| Клиническая биохимия
|
Приведенные в табл.
М2 .значения допустимой аналитической вариапии рассматриваются как средние ориентировочные величины. Данные вариации, приведенные для лейкоцитов и эритроцитов, относятся к подсчету клеточных элементов ручными методами (в камере Горяева), при использовании гематологических анализаторов коэффициент аналитической вариации для лейкоцитов составляет 1-3%, для эритроцитов - 1-2%, тромбоцитов - 2-4%.
Таким образом, при оценке результатов лабораторных исследований медицинской сестре необходимо учитывать влияние условий взятия, хранения, транспортировки проб биоматеоиала, знать аналитическую надежность лабораторных методов исследования, т.е. быть уверенной в точности получаемой с их помощью информации о соответствующих компонентах биоматсриала. Референтные величины служат основой оценки результатов анализов. При этом чем больше степень отклонения результата от референтной величины, тем выше достоверность наличия патологии или того, что имеющаяся патология весьма значительна.
Результаты лабораторных исследований подвержены влиянию биологической и аналитической вариации. Если аналитическая вариация зависит от условий выполнения теста, то величина биологической вариации - от целого комплекса факторов. Общая биологическая вариация исследуемых показателей обусловлена внутрииндивидуальной вариацией, наблюдаемой у одного и того же человека в результате влияния биологических ритмов (разное время дня, года), и межиндивидуальной вариацией, вызванной как эндогенными, так и экзогенными факторами, главные из которых представлены на Рис.
Факторы биологической вариации (физиологические факторы, факторы среды, условия взятия пробы, токсичные и терапевтические факторы) могут оказать влияние на результаты лабораторных исследований. Часть из них способна вызывать реальные отклонения лабораторных результатов от референтных значений вне связи с патологическим процессом [Меньшиков В.В., 1995]. К таким факторам относят следующие.
■ Физиологические закономерности (влияние расы, пола, возраста, типа сложения, характера и объёма привычной активности, питания).
■ Влияние окружающей среды (климат, геомагнитные факторы, время года и суток, состав воды и почвы в зоне обитания, социально-бытовая среда).
Рис. Последовательность оценки результатов лабораторных исследований
■ Воздействие профессиональных и бытовых токсичных средств [алкоголь, никотин, наркотики) и ятрогенные влияния (диагностические и лечебные процедуры, лекарственные средства (ЛС)].
■ Условия взятия пробы (приём пищи, физическая нагрузка, положение тела, стресс во время взятия пробы и др.).
■ Методика взятия крови (способ взятия, средства и посуда, консерванты и т.д.).
■ Неправильный (по времени) забор материала.
■ Условия (температура, встряхивание, влияние света) и время транспортировки биоматериала на исследования в лабораторию.
Рис. Факторы, влияющие на биологическую вариацию [Гаранина Е.Н., 1997].
Рассмотрим влияние наиболее важных факторов на результаты лабораторных анализов.
Приём пищи. Режим питания, состав принимаемой пищи, перерывы в её приёме оказывают существенное влияние на ряд показателей лабораторных исследований. После 48 ч голодания может увеличиваться концентрация билирубина в крови. Голодание в течение 72 ч снижает концентрацию глюкозы в крови у здоровых людей до 2,5 ммоль/л (45 мг%), увеличивает
концентрацию триглицеридов (ТГ), свободных жирных кислот без значительных изменений концентрации холестерина (ХС) .
Употребление жирной пищи может повысить концентрацию калия, ТГ и щелочной фосфатазы. Активность щелочной фосфатазы в таких случаях может особенно увеличиваться у людей с О- или В-группой крови . Физиологические изменения после употребления жирной пище в виде гиперхиломикронемии могут увеличивать мутность сыворотки (плазмы) крови и тем самым влиять на результаты измерения оптической плотности. Повышение концентрации липидов в сыворотке крови может быть после употребления пациентом масла, крема или сыра, что приведёт к ложным результатам и потребует повторного анализа.
Потребление большого количества мяса, то есть пищи с высоким содержанием белка, может увеличить концентрации мочевины и аммиака в сыворотке крови, уратов в моче. Пища с высоким отношением ненасыщенных жирных кислот к насыщенным может вызвать снижение концентрации ХС в сыворотке крови, а пища, богатая пуринами, вызывает увеличение концентрации уратов. Бананы, ананасы, томаты, авокадо богаты серотонином. При их употреблении за 3 дня до исследования мочи на 5-оксииндолуксусную кислоту даже у здорового человека её концентрация может быть повышенной. Напитки, богатые кофеином, увеличивают концентрацию свободных жирных кислот и вызывают выход катехоламинов из надпочечников. Приём алкоголя увеличивает в крови концентрацию лактата, мочевой кислоты и ТГ.
Общее правило для исключения влияния принимаемой пищи на результаты лабораторных исследования - забор крови после 12-часового голодания.
Физические упражнения. Физическая нагрузка может оказывать как преходящее, так и длительное влияние на различные параметры гомеостаза. Преходящие изменения включают в себя вначале снижение, а затем увеличение концентрации свободных жирных кислот в крови, повышение на 180% концентрации аммиака и на 300% - лактата, увеличение активности креатинкиназы (КК), аспартат аминотрансферазы (АСТ), лактат дегидро-геназы (ЛДГ) . Физические упражнения активируют свёртывание крови, фибринолиз и функциональную активность тромбоцитов. Изменения указанных показателей связаны с активацией метаболизма, они обычно возвращаются к исходным (до физической нагрузки) значениям вскоре после прекращения физической деятельности. Тем не менее активность некоторых ферментов (альдолаза, КК, АСТ, ЛДГ) может оставаться повышенной в течение 24 ч после 1-часовой интенсивной физической нагрузки. Длительная физическая нагрузка увеличивает концентрацию в крови половых гормонов, включая тестостерон, андрос-тендион и лютеинизирующий гормон (ЛГ) .
Эмоциональный стресс может вызывать преходящий лейкоцитоз, снижение концентрации железа и изменение уровня катехоламинов в крови. Сильное беспокойство, сопровождаемое гипервентиляцией, вызывает дисбаланс кислотно-основного состояния (КОС) с увеличением концентрации лактата и жирных кислот в крови.
Другие факторы. Среди других факторов, влияющих на результаты исследований, имеют значение суточные ритмы гомеостаза, возраст, пол, беременность, географическое положение местности, высота над уровнем моря, температура окружающей среды, курение. У курильщиков может
быть повышена концентрация карбоксигемоглобина (HbCO), катехолами-нов в плазме крови и кортизола в сыворотке крови. Изменения концентрации этих гормонов часто приводят к снижению количества эозинофилов, в то время как содержание нейтрофилов, моноцитов и свободных жирных кислот увеличивается. Курение приводит к увеличению концентрации гемоглобина (Hb), количества эритроцитов, среднего объёма эритроцита (MCV) и снижению количества лейкоцитов. В связи с этим лабораториям рекомендуется устанавливать свои локальные референтные (нормальные) величины для своей популяции.
Для того чтобы уменьшить влияние приведённых факторов на результаты анализов, перед забором крови на исследование необходимо воздержание от физических нагрузок и приёма алкоголя, изменений в питании в течение 24 ч. Пациент не должен принимать пищу после ужина, ему необходимо лечь спать накануне в обычное для него время и встать не позднее чем за 1 ч до взятия крови . Рекомендуется производить забор крови у пациента в ранние утренние часы после 12-часового ночного голодания (базовое состояние), что позволяет максимально стандартизировать условия исследования.
Лекарственные средства. Некоторые ЛС могут оказывать существенное влияние на результаты исследований. Например, приём ацетилсалициловой кислоты при определении времени длительности кровотечения по Дуке следует отменить за 7-10 дней до исследования, в противном случае можно получить патологический результат. В случае, если принимаемое пациентом ЛС может повлиять на результат анализа, и при невозможности его отмены необходимо информировать об этом лабораторию.
Влияние ЛС на результаты лабораторных исследований может быть двух типов.
■ Физиологическое влияние in vivo (в организме пациента) ЛС и их метаболитов.
■ Влияние in vitro (на химическую реакцию, используемую для определения показателя) благодаря химическим и физическим свойствам ЛС (интерференция).
Физиологическое влияние ЛС и их метаболитов во многом известны практическим врачам. Рассмотрим значение интерференции, то есть вмешательства постороннего фактора в результаты анализа.
Интерференция может быть вызвана наличием в пробе биоматериала как эндогенного, так и экзогенного вещества. К основным эндогенным интерферирующим факторам относят следующие.
■ Гемолиз, то есть разрушение эритроцитов с выходом в жидкую часть крови ряда внутриклеточных компонентов (Hb, ЛДГ, калия, магния и др.), что изменяет истинные результаты определения концентрации/ активности таких компонентов крови, как билирубин, липаза, КК, ЛДГ, калий, магний и др.
■ Липемия, извращающая результаты ряда колориметрических и нефело-метрических методов исследования (особенно при исследовании фосфора, общего билирубина, мочевой кислоты, общего белка, электролитов).
■ Парапротеинемия, вызывающая изменения результатов определения некоторыми методами фосфатов, мочевины, кк, ЛДГ, амилазы.
Наиболее частые экзогенные интерферирующие факторы - ЛС или их метаболиты. Так, при определении катехоламинов флуориметрическим методом в моче интенсивную флюоресценцию может вызывать принимаемый пациентом тетрациклин; метаболит пропранолола 4-гидроксипропранолол интерферирует при определении билирубина методами Йендрассика-Гро-фа и Эвелина-Меллоя.
Выявить интерференцию ЛС - одна из задач врача клинической лабораторной диагностики. Важный шаг для решения этой проблемы - контакт с клиницистом для выяснения характера принимаемых пациентом препаратов.
Положение тела при заборе крови также влияет на ряд показателей. Так, смена пациентом положения лёжа на положение сидя или стоя приводит к гидростатическому проникновению воды и фильтрующихся веществ из внутрисосудистого пространства в интерстициальное. Вещества, имеющие большую молекулярную массу (белки), и клетки крови со связанными с ними веществами не проходят в ткани, поэтому их концентрация в крови повышается (ферменты, общий белок, альбумин, железо, билирубин, ХС, ТГ, ЛС, связанные с белками, кальций). Могут увеличиваться концентрация Hb, Ht, количество лейкоцитов.
Место и техника забора крови также могут оказать существенное влияние на результаты лабораторных тестов (например, наложение жгута на период времени более 2 мин при заборе крови из вены может привести к гемоконцентрации и увеличению концентрации в крови белков, факторов коагуляции, содержания клеточных элементов). Лучшее место забора крови на анализы - локтевая вена. Следует также отметить, что венозная кровь - лучший материал не только для определения биохимических, гормональных, серологических, иммунологических показателей, но и для общеклинического исследования. Это обусловлено тем, что применяемые в настоящее время гематологические анализаторы, с помощью которых проводят общеклинические исследования крови (подсчёт клеток, определение Hb, Ht и др.), предназначены для работы с венозной кровью, и в большинстве своём в странах, где их производят, они сертифицированы и стандартизированы для работы только с венозной кровью. Выпускаемые фирмами калибровочные и контрольные материалы также предназначены для калибровки гематологических анализаторов по венозной крови. Помимо этого, при заборе крови из пальца возможен ряд методических особенностей, которые стандартизировать очень трудно (холодные, циано-тичные, отёчные пальцы, необходимость в разведении исследуемой крови и др.), что приводит к значительным разбросам в получаемых результатах и как следствие - к необходимости повторных исследований для уточнения результата. Для общеклинического исследования кровь из пальца рекомендуют забирать в следующих случаях.
■ При ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента.
■ При наличии у пациента очень мелких вен или их малой доступности.
■ При выраженном ожирении пациента.
■ При установленной склонности к венозному тромбозу.
■ У новорождённых.
Пункцию артерии для забора крови используют редко (преимущественно для исследования газового состава артериальной крови).
Время и условия транспортировки проб биологического материала также играют важную роль в обеспечении качества результатов лабораторных исследований. При доставке материала в лабораторию всегда необходимо помнить об особенностях некоторых проб. Например, при заборе артериальной крови для исследования газового состава ёмкость с кровью должна быть хорошо закупорена, погружена в ледяную воду и как можно скорее доставлена в лабораторию, поскольку гликолиз в эритроцитах и лейкоцитах вызывает снижение рН, если проба будет находиться приблизительно 20 мин при комнатной температуре. Эти требования необходимо соблюдать и при исследовании капиллярной крови, которую забирают в гепаринизи-рованные капилляры. Кровь для исследования на адренокортикотропный гормон (АКТГ), ангиотензин I, II, ренин также должна быть сразу после забора помещена в лёд и как можно быстрее доставлена в лабораторию.
В целом, чтобы избежать влияния временного фактора на результаты анализов, доставку материала в лабораторию необходимо производить как можно быстрее. Чем раньше сыворотка отделена от эритроцитов, тем меньше влияние гликолиза (значит, меньшим будет влияние на концентрацию глюкозы, фосфора и активность некоторых ферментов). Концентрация билирубина в крови снижается под воздействием света (особенно яркого солнечного). Действие света также повышает активность щелочной фосфатазы. Фактор времени очень важен и при бактериологических исследованиях (некоторые бактерии погибают при комнатной температуре).
Время доставки биоматериала в лабораторию должно укладываться в интервалы, представленные в табл.. При их соблюдении удаётся максимально снизить негативное влияние временного фактора на результаты лабораторных анализов.
Таблиия 1-1. Сроки доставки проб в лабораторию
Указанные нормативы времени доставки должен знать каждый врач-клиницист. При их нарушении необходим повторный забор проб, так как исключить влияние фактора времени на отклонения в результатах исследований не представляется возможным.
Кроме всего перечисленного, величина биологической вариации зависит от физиологической функции, выполняемой в организме анализируемым веществом. Наименьшая биологическая вариация характерна для веществ, наиболее важных для стабильности состава и объёма внеклеточных жидкостей и крови (натрий, хлориды, кальций, магний, альбумин, общий белок, углекислый газ). Вариация средней степени характерна для веществ, участвующих в процессах анаболизма (глюкоза, ХС, фосфор). Наибольшей биологической вариацией обладают компоненты сыворотки крови, которые являются конечными продуктами катаболизма (мочевая кислота, мочевина, креатинин), а также выделяемые из тканей вещества и ферменты [ЛДГ, АСТ, аланин аминотрансфераза (АЛТ) и др.].
Назначение общего анализа крови – давно устоявшаяся традиция для подавляющего большинства врачей любой специальности. Общий анализ позволяет оценить количество форменных элементов, а именно эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов (без тонкостей и фракций различных типов), уровень гемоглобина и скорость оседание эритроцитов (СОЭ).
Анализ достаточно простой, тем не менее – этой информации достаточно, чтобы заподозрить воспалительный процесс, увидеть анемию, а в некоторых случаях – заподозрить рак крови или другую патологию стволовых клеток.
Общий анализ крови – направляющий для многих последующих тестов и диагностических процедур, поэтому важно провести его правильно.
Как правильно сдавать общий анализ крови
Общий анализ крови следует сдавать, придерживаясь рекомендаций врача
Любой анализ крови, в т.ч. общий, необходимо сдавать натощак, т.е. период между анализом и последним приёмом пищи должен быть больше 8 часов, но меньше 14.
Перед этим нельзя употреблять острую и жирную пищу, переедать – это может повлиять на СОЭ. Вообще, за сутки до сдачи общего анализа лучше избегать любых провоцирующих факторов, таких как стресс, избыточная физическая нагрузка, обезвоживание или чрезмерное употребление жидкостей (по любой причине).
На результаты анализа могут повлиять различные лекарства, некоторые из которых отменить нельзя (например – ацетилсалициловая кислота не может отменяться ни на один день).
Разумеется, общий анализ крови нельзя сдавать в состоянии токсического или алкогольного опьянения. Это же относится ко всем разновидностям гашиша и т.п. Нужно понимать, что важен период полувыведения токсина. Ваше самочувствие не может быть мерилом в данном случае – с момента интоксикации должно пройти не менее 48 часов.
Общие принципы сдачи анализа (фото)
Приходить вовремя
Не курить
Не употреблять алкоголь
Сдавать натощак
Желательно за час до общего анализа не курить, т.к. курение снижает количество эозинофилов в общем пуле крови, т.е. влияет на показатель «количество лейкоцитов».
Не следует сдавать анализ «на бегу», т.е. желательно посидеть и успокоиться в течении 15 минут до сдачи.
Бывает, что при полном соблюдении вышеуказанных принципов, результаты получаются искажёнными, что выясняется несколько позже. Это может привести к тому, что правильный диагноз достаточно долго будет ускользать от врача, а пациент будет терять время и деньги на поиски несуществующей проблемы. Вторым неприятным моментом становится иллюзия отсутствия патологического состояния, возникшая из-за ряда неучтённых перед анализом факторов.
Факторы, влияющие на результаты анализа
Страх перед процедурой сильно влияет на результаты
Мы не будем разбирать ошибки лабораторий (это отдельная тема для беседы), опишем лишь факторы со стороны пациентов, которые могут приводить к ошибочной трактовке общего анализа крови.
Страх перед врачами, анализами, скарификаторами. Формируется с детства. Из-за выброса адреналина происходит выход клеточных элементов (в первую очередь эритроцитов) из депо крови (печень и т.п.). В результате в крови увеличивается количество клеток крови и уровень гемоглобина, врач наблюдает полицитемию и направляет здорового пациента к гематологу. Второй вариант – пациент с желудочным кровотечением, например, на фоне стресса показывает нормальный уровень гемоглобина, его отпускают домой «попить витамины», после чего развивается массивная анемия с госпитализацией и прочими неприятными исходами.
Если вы боитесь всех этих людей в белом, а также их страшных инструментов – предупреждайте врача об этом заранее (или ходите на анализы с близкими).
Общий анализ крови может изменяться у беременных
Обильные менструальные кровотечения (как и любые другие) могут также искажать показатели общего анализа крови. Желательно сдавать анализ только через 4-5 дней после их окончания.
Время, в течении которого необходимо сдать анализ, должно приходиться на период с 7:00 до 9:00 (утро). Это связано не только с порядком работы ЛПУ (что можно при желании преодолеть), но и с собственно биоритмами человеческого организма. Показатели крови в течение дня могут достаточно ощутимо меняться.
Если вы принимаете любые обезболивающие и противовоспалительные препараты – сообщите об этом врачу. Подобные вещества скрадывают признаки воспаления, поэтому (если это возможно) их отменяют за неделю до предполагаемой даты анализа.
Гудер В.Г. и др.
Биологические факторы. Неустранимые факторы
Внутренние факторы, такие как раса, пол и возраст, могут влиять на концентрации исследуемых клинико-химических и гематологических аналитов. Эти факторы являются индивидуальными особенностями пациента и поэтому их нельзя устранить. Очень часто внутренние и внешние факторы трудно разграничить.
Возраст может влиять на концентрации аналитов в крови и моче в период сразу после рождения, в пубертатный период и в старости. Число эритроцитов и, следовательно, гемоглобин у новорожденных значительно выше, чем у взрослых. В течение нескольких первых дней после рождения повышенное содержание кислорода в артериальной крови вызывает разрушение эритроцитов. Это приводит к повышению содержания гемоглобина и усиленному преобразованию его в билирубин. Поскольку функция печени (в данном случае - особенно глкжуронидация) у новорожденных еще не полностью установилась, наблюдается повышение концентрации билирубина.
Концентрация мочевой кислоты у новорожденных находится в тех же пределах, что и у взрослых людей. Однако, в течение нескольких дней после рождения отмечается ее значительное снижение. Среди других примеров возрастной зависимости - активность щелочной фосфатазы (ЩФ) в сыворотке (пик которой в период фазы роста отражает активность остеобластов в костной ткани) и содержание общего холестерина и липопротеинов низкой плотности. Кроме того, возрастная зависимость активности ЩФ и содержания липопротеинов низкой и высокой плотности в сыворотке испытывает влияние пола. Эти половые различия, в свою очередь, изменяются с возрастом.
Раса. Содержание аналитов от расовой принадлежности. По сравнению с европейцами у чернокожих американцев обоего пола содержание лейкоцитов существенно меньше. Эта разница без труда объясняется за счет уменьшенного числа гранулоцитов. Наоборот, содержание гемоглобина, гематокрита и число лимфоцитов одинаково в обеих группах. Число моноцитов у европейцев превышает этот показатель у негров. Значительные различия в активности креатинкиназы наблюдаются в обеих половых группах между европейцами и неграми. Эти различия не зависят от разницы в возрасте, росте и массе тела. Существенные различия в активности амилазы обнаружены между коренными жителями Западной Индии и исконными британцами. Исходя из общепринятого порогового значения, 50% уроженцев Западной Индии имели повышенную активность амилазы.
Значительные расовые различия были отмечены в отношении концентрации в сыворотке витамина В12 (у негров населения концентрация выше в 1,35 раза (183)) и Lp(a) (по сравнению с европейцами у негров концентрация в 2 раза выше). Важно, что при этом у негров, обладающих высоким уровнем Lp(a), не были повышены ни частота возникновения атеросклероза, ни смертность.
Пол. Как и в отношении внешнего вида и специфичных для каждого пола гормональных уровней, различия могут быть обнаружены и в клинико-химических и гематологических показателях). Половые различия в концентрации железа в сыворотке исчезают у пациентов старше 65 лет. Половые различия имеются и в активности креатинкиназы, и в концентрации креатинина. Сывороточная активность и концентрация зависят от мышечной массы, которая обычно более выражена у мужчин. Определенная спортивная тренировка, которая ведет к увеличению мышечной массы, может сглаживать эти различия.
Беременность. Трактуя результаты лабораторных исследований у беременных, необходимо учитывать срок беременности в момент взятия пробы. При физиологической беременности средний объем плазмы возрастает примерно от 2600 мл до 3900 мл, причем в первые 10 недель прирост может быть незначительным, а затем происходит нарастающее увеличение объема к 35 неделе, когда достигается указанный уровень. Объем мочи также может физиологически увеличиваться до 25% в 3-ем триместре. В последнем триместре наблюдается 50%-ное физиологическое повышение скорости клубочковой фильтрации. Хорошо известные свойственные беременности изменения выработки и концентрации в плазме половых гормонов сопровождаются изменениями различных аналитов, например тироидных гормонов, метаболитов, электролитов, белков и некоторых диагностически важных липидов, ферментов, факторов свертывания и компонентов фибринолитической системы. Скорость оседания эритроцитов при беременности повышается в 5 раз. Изменения концентраций аналитов вызваны повышением синтеза транспортных белков, увеличением скорости обменных процессов и разведением крови.
Изменение физического состояния
Диета и потребление жидкости служат основными факторами, влияющими на многие аналиты в клинической химии. Степень вызванных приемом пищи изменений содержания аналитов зависит от состава пищи времени, прошедшем от момента приема пищи до взятия пробы. На концентрацию холестерина и триглицеридов в сыворотке оказывают влияние такие факторы, как состав пищи, физическая активность, курение, употребление алкоголя и кофе. Напротив, при диете, богатой белками и нуклеотидами, наблюдается повышение уровней аммиака, мочевины и мочевой кислоты. Изменения, наблюд,ющиеся после приема стандартного количества углеводов (75 г), используются в диагностике при определении толерантности к глюкозе. С другой стороны, недостаточное питание и голодание могут изменить концентрации аналитов клинически значимым образом. Ранними индикаторами бедной белками диеты являются снижение концентрации преальбумина и ретинол-связывающего белка.
Голодание. Длительное голодание тесно связано со снижением расхода энергии и, как следствие, в сыворотке снижены концентрация Т4 и в еще большей степени Т3. Помимо данных изменений, при длительном голодании также изменяется экскреция с мочой многих веществ. Экскреция с мочой аммиака и креатинина повышается тогда как выделение мочевины, кальция и фосфатов снижается. Изменения концентрации аналитов при длительном голодании подобны тем, которые наблюдаются у пациентов после хирургических вмешательств и в катаболическом состоянии.
При количественном измерении уровней мочевой экскреции предпочтительно выполнять определение показателей за сутки, чем на литр, чтобы исключить влияние количества выпиваемой воды и ее выведения.
Во избежание неправильной интерпретации лабораторных результатов в качестве стандартной процедуры взятие образцов рекомендуется производить после 12-часового голодания и при сниженной физической активности.
Физические упражнения. Следует выделить 2 типа упражнений. При упражнениях первого типа - статических или изометрических упражнениях короткой продолжительности и высокой интенсивности - используется энергия, уже запасенная в мышцах (АТФ, креатинфосфат), и при упражнениях второго типа - динамических или изотонических упражнениях малой интенсивности и большой продолжительности (например, бег, плавание, езда на велосипеде) - используется АТФ, образуемый аэробным или анаэробным путем. Кроме того, следует учитывать влияние физической тренированности и мышечной массы. Быстро возникающие изменения аналитов во время упражнений обусловлены сдвигами объемов жидкости между внутрисосудистым и интерстициальным пространствами, потерей жидкости в связи с потоотделением и изменением концентрации гормонов (например, повышения концентрации адреналина, норадреналина, глюкагона, СТГ, кортизола, АКТГ и снижения концентрации инсулина).
Эти гормональные сдвиги, в свою очередь, могут приводить к изменениям числа лейкоцитов более чем до 25 г/л, а также повышению концентрации глюкозы.
Изменения могут отчасти объясняться вышеупомянутым смещением объема жидкости из внутрисосудистого пространства в интерстициальное или потерей жидкости с потом. Повышение концентрации мочевой кислоты в сыворотке является следствием снижения ее экскреции с мочой из-за повышения концентрации лактата. Опосредованный гипоксией прирост кретинкиназы зависит от состояния тренированности и, следовательно, показывает высокую степень индивидуальной вариабельности. У физически менее тренированного человека увеличение содержания креатинкиназы более выражено. Тренировка повышает количество и размер митохондрий, что сочетается с повышенной емкостью окислительной ферментной системы. Это, в свою очередь, повышает способность мышц потреблять глюкозу, жирные кислоты и кетоновые тела по по путям аэробного окисления. Как следствие, доля митохондриального изофермента КК - МВ возрастает до 8% от общей активности креатинкиназы без признаков нарушения функции миокарда. Хорошо тренированные люди имеют более высокий процент КК-МВ в скелетных мышцах по сравнению с нетренированными. Некоторые другие аналиты также зависят от степени тренированности и мышечной массы. Так, содержание креатинина в плазме, в моче и его экскреция повышены, а образование лактата снижено после выполнения физических упражнений у тренированных людей по сравнению с нетренированными. Чрезмерная физическая нагрузка может вызвать появление в моче эритроцитов и других клеток крови. Тем не менее, вызванные физической нагрузкой изменения обычно исчезают в течение нескольких дней.
Высота над уровнем моря. Содержание некоторых компонентов крови подвержено значительным изменениям в зависимости от высоты над уровнем моря. С увеличением высоты значительное повышение наблюдается в отношении, например С-реактивного белка (до 65% на высоте 3600 м), (32-глобулина в сыворотке (до 43% на высоте 5400 м), гематокрита и гемоглобина (до 8% на высоте 1400 м) и мочевой кислоты. Адаптация к высоте занимает недели, а возвращение к значениям на уровне моря происходит в течение нескольких дней. Значительное снижение величин с ростом высоты над уровнем моря обнаружено в отношении мочевого креатинина, клиренса креатинина, эстриола (до 50% на высоте 4200 м), осмоляльности сыворотки, ренина плазмы и трансферрина сыворотки.
Стимуляторы и вызывающие зависимость препараты в качестве влияющих факторов биологического характера
Кофеин содержится во многих компонентах повседневной пищи. Несмотря на его широкое распространение, влияние кофеина на различные клинико-химические аналиты детально не исследовано. Кофеин ингибирует фосфодиэстеразу и, следовательно, расщепление циклического АМФ. Циклический АМФ усиливает гликогенолиз, тем самым увеличивая концентрацию глюкозы в крови. Кроме того, концентрация глюкозы возрастает из-за стимуляции глюконеогенеза под влиянием адреналина. Активация триглицеридлипазы ведет к троекратному повышению этерифицированных жирных кислот. Количественное определение гормонов и лекарственных веществ, связанных с альбумином, затрудняется из-за вызванного жирными кислотами эффекта замещения. Через 3 часа после приема 250 мг кофеина повышается активность ренина плазмы и концентрация катехоламинов. Следовательно, при исследовании данных аналитов потребление кофеина должно учитываться.
Влияние курения. Курение вызывает множество острых и хронических изменений концентраций аналитов, причем хронические эффекты скорее умеренные. Курение повышает концентрации в плазме или сыворотке жирных кислот, адреналина, свободного глицерина, альдостерона и кортизола. Эти изменения наблюдаются в пределах 1 часа при курении 1-5 сигарет. Изменения, вызванные хроническим курением, касаются числа лейкоцитов, липопротеинов, активности некоторых ферментов гормонов, витаминов, опухолевых маркеров, тяжелых металлов.
Механизм, лежащий в основе этих изменений, полностью не выяснен. В табачном дыме обнаружено большое количество соединений пиридина, цианистый водород и тиоцианаты. Их прямое и непрямое влияние может учитываться применительно к возникающим изменениям концентрации.Снижение активности ангиотензин-превращающего фермента (АПФ) у курильщиков признается результатом деструкции клеток легочного эпителия с последующим снижением высвобождения АПФ в системе легочного кровообращения и/или ингибированием фермента. Степень изменений также зависит от количества, вида (сигареты, сигары, трубки) и техники курения (с вдыханием дыма или без этого). Кроме того, вызванные курением изменения зависят от возраста и пола.
Алкоголь. Употребление алкоголя в зависимости от его продолжительности и степени может влиять на многие аналиты. Эти изменения частично используются для диагностики и терапевтического мониторинга. Среди обусловленных алкоголем изменений следует выделять остро и хронически возникающие изменения.
Остро возникающие изменения (в течение 2-4 часов) при употреблении этилового спирта проявляются снижением глюкозы в сыворотке и повышением лактата в плазме в результате торможения глюконеогенеза в печени. Этанол превращается в ацетальдегид и затем в ацетат. Это повышает образование в печени мочевой кислоты. Вместе с лактатом ацетат снижает содержание бикарбоната в сыворотке, вызывая метаболический ацидоз. Повышенный уровень лактата снижает экскрецию с мочой мочевой кислоты. Как следствие, после острого употребления алкоголя концентрация мочевой кислоты в сыворотке возрастает. Хронические изменения, возникающие при употреблении этилового спирта включают повышение в сыворотке активности печеночных ферментов. Повышение активности гамма-глютамилтрансферазы вызывается индукцией фермента. Активность глютаматдегидрогеназы, как и аминотрансфераз (ACT, АЛТ), повышается вследствие прямого токсического влияния на печень. Повышение в крови десиалированных белков (например, углевод-дефицитного трансферрина) связано с торможением ферментативного гликозилирования в пост-трансляционной стадии образования этих белков в печени. При хроническом алкоголизме содержание сывороточных триглицеридов возрастает вследствие снижения расщепления триглицеридов в плазме. Повышение MCV может быть связано с прямым токсическим влиянием на кроветворные клетки или в связи с дефицитом фолиевой кислоты.
Препараты, вызывающие зависимость. Вызывающие зависимость вещества, такие как амфетамин, морфин, героин, марихуана и кокаин, могут оказывать влияние на результаты лабораторных тестов. Морфин вызывает спазм сфинктера Одци, что приводит к повышению таких ферментов, как амилаза и липаза.
Взятие образцов. Влияние циркадного ритма
Некоторые аналиты обнаруживают тенденцию к колебаниям их концентрации в плазме в течение суток. Так, концентрация калия ниже после полудня, по сравнению с утренней, тогда как содержание кортизола возрастает в течение дня и снижается ночью. Ритм кортизола является причиной недостоверных результатов теста на толерантность к глюкозе, проводимого во второй половине дня. По этой причине референтные интервалы обычно устанавливают при исследованиях между 7 и 9 часами утра. На циркадном ритме могут отражаться влияния индивидуальных ритмов - еды, сна, физической активности. Эти влияния не следует путать с действительно циркадными колебаниями. В некоторых случаях следует учитывать сезонные влияния. Так, содержание трийодтиронина (Т3) на 20% ниже летом, чем зимой, тогда как 25-ОН-холекальциферол обнаруживается в большей концентрации летом.
Аналиты могут изменяться в течение менструального цикла. Статистически значимые изменения аналитов могут быть вызваны колебаниями уровней гормонов при менструации. Так, концентрация альдостерона в плазме определяется в два раза выше перед овуляцией, чем в фолликулярной фазе. Подобным образом, ренин может проявить преовуляторное повышение. Даже холестерин существенно снижается при овуляции. Наоборот, фосфаты и железо снижаются при менструации.
Выбор времени по отношению к диагностическим и лечебным процедурам. Многие диагностические процедуры способны оказывать влияние на результаты лабораторных исследований. Чтобы предотвратить такое влияние, взятие проб необходимо производить до выполнения диагностических процедур, способных оказать влияние на результаты теста. Точно так же введение лекарственных препаратов, способных оказать влияние на результаты исследований, следует назначать после взятия у него проб крови.
С другой стороны, при проведении лекарственного мониторинга точное время взятия пробы становится очень важным для правильной интерпретации результата исследования уровня лекарственного вещества.
Важные правила выбора времени взятия проб биоматериалов:
По возможности, пробы следует брать между 7 и 9 часам утра.
Взятие проб должно выполнятся через 12 часов после последнего приема пищи.
Взятие проб должно выполнятся до проведения диагностических и лечебных процедур, способных оказать влияние на результаты теста.
В случае проведения лекарственного мониторинга следует учитывать наличие пика концентрации после введения лекарственного препарата и фазу устойчивого состояния перед введением следующей дозы препарата.
Всегда следует отмчать точное время взятия пробы в соответствующих документах.
Анализ пробы, взятой не во время, может быть хуже, чем отсутствие анализа вообще.
Проба, результат анализа которой поступает слишком поздно, взята напрасно.
Транспартировка и хранение
Влияния времени и температуры при транспортировке. Передача проб в лабораторию может осуществляться различными путями. Обычно пробы передаются за короткий срок, если лаборатория расположена поблизости или в самой клинике и при этом не возникает никаких проблем. Однако интервал времени от момента взятия пробы крови до ее центрифугирования не должен превышать1 час. Выполнение некоторых аналитических процедур требует использования специальных добавок, например, фторид натрия/оксалат для количественного определения лактата или натрий-борат серина ЭДТА для определения аммиака. Определение требует осторожного обращения с пробой ЭДТА крови. Передача проб в лабораторию может быть осуществлена с курьером или использованием пневматической почты. Лучшие системы последнего типа обеспечивают бережную транспортировку проб, не вызывающую гемолиза. Такие пробы могут быть использованы для определения аналитов в клинической химии, гематологии или для проведения анализа газов крови. Если по техническим причинам требуется транспортировка проб на большие расстояния, (например, по почте или через лабораторного курьера), то использование проб цельной крови должно быть исключено.
Высвобождение калия из эритроцитов при комнатной температуре минимально вследствие температурной зависимости активности Na+K+ -АТФ-азы. Этот эффект усиливается при 4 °С и свыше 30 °С. Концентрация глюкозы с повышением температуры снижается, тогда как в отношении явление, поскольку его концентрация повышается под влиянием активности фосфатаз в сыворотке и эритроцитах.
В пробах крови,полученных патологией, могут наблюдаться наблюдаемых под влиянием времени и температуры. При лейкоцитозе зависимое от фактора времени снижение концентрации глюкозы еще более выражено. Аналогично, концентрации аммиака усиливается Y-глютамилтрансферазы. Изменение количества клеток крови влияние зависимости самих антител от температуры.
При пересылке крови или других биологических жидкостей, взятых от человека, в отдаленную лабораторию должны соблюдаться строгие правила безопасности. Кроме того, должна быть обеспечена целостность пробы для того, чтобы результат анализа был бы правильным. Образцы, пересылаемые по почте, должны «быть устойчивыми к протеканию содержимого, ударам, изменениям давления и другим воздействиям, которые могут возникнуть при обычной транспортировке».
Процедура определяется стабильностью компонентов пробы. Наиболее важные причины нарушения качества образца следующие:
Метаболизм клеток крови
Испарение/сублимация
Химические реакции
Разрушение микробами
Осмотические процессы
Воздействие света
Диффузия газа
Быстрая транспортировка и короткий срок хранения улучшают достоверность результатов лабораторных исследований.
Образцы и пробы сохраняются тем лучше, чем ниже температура их хранения хранения (но, заметьте, существуют исключения!).
Образцы и пробы всегда должны храниться в закрытых сосудах (испарение!).
Опасность испарения существует и в холодильниках (конденсация влаги на охлаждающих элементах).
Проблемы хранения уменьшаются при использовании одноразовых систем для сбора проб.
Разделительные элементы (например, разделительные гели) улучшают выход сыворотки/плазмы и позволяют оставлять сыворотку в первичных пробирках над сгустком.
Избегайте встряхивания сосудов с пробами (системы пневматической доставки пробирок!): риск гемолиза.
Всегда храните сосуды с кровью в вертикальном положении; процесс свертывания ускоряется.
Маркируйте инфицированный материал и обращайтесь с ним с особой осторожностью.
