Акмолинская область,

Бурабайский район,

«Сельскохозяйственный колледж село Катарколь»

Петрова Ю.Н.

преподаватель специальных дисциплин

НОВЫЙ МЕТОД ВЗЯТИЯ КРОВИ У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Весна – это период проведения диагностических и лечебно-профилактических мероприятий у сельскохозяйственных животных. Массовое взятие крови у поголовья крупного рогатого скота для диагностических исследований на бруцеллёз – это трудоёмкая и иногда травмирующая животных процедура.

На сегодняшний день внедрение в животноводство новых, не травмирующих животных и наименее трудоёмких методов взятия крови, является актуальной задачей для ветеринарной службы Акмолинской области.

В течение нескольких лет специалистами управления ветеринарии Акмолинской области были организованы семинары, в практической части которых отрабатывалась методика взятия крови с помощью вакуумных систем. На сегодняшний день благодаря неоспоримым преимуществам данная методика получила широкое распространение и активно используется в хозяйствах всех форм собственности на территории Акмолинской области.

Использование вакуумных шприцев-контейнеров коренным образом меняет технологию взятия крови у поголовья крупного рогатого скота. Речь идёт не только об упрощении процедуры взятия крови, что само по себе немаловажно, но и о значительном снижении процента преаналитических ошибок, увеличении безопасности процедуры, снижении риска заражения скота различными заболеваниями, сохранения уровня надоев после процедуры и отсутствия осложнений у животных после взятия крови.

До сегодняшнего дня широко распространённым способом взятия проб крови у крупного рогатого скота оставался способ взятие её из ярёмной вены с использованием кровопускательных (или инъекционных) игл и стеклянных пробирок (не вакуумных).

Устаревший способ взятия крови у крупного рогатого скота

Взятие крови с использованием кровобрательных игл и пробирок. Иглы для взятия крови должны быть с коротким срезом и достаточно большим диаметром, чтобы не травмировать противоположную стенку вены и не вызвать повреждения эритроцитов. Иглы перед взятием крови обязательно стерилизуют кипячением. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригают, а кожу дезинфицируют дезинфицирующим раствором.

У крупного рогатого окота кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи.

Брать кровь для получения сыворотки надо по возможности утром, до кормления животных. Для серологического исследования берут по 7-10 мл крови от крупного рогатого скота.

При взятии крови из яремной вены иглу вкалывают на границе перехода верхней трети шеи в среднюю. Чтобы вызвать достаточное наполнение вены и уменьшать ее подвижность, вену сдавливает в середине шеи резиновым жгутом или пальцем. При проколе вены необходимо держать иглу в руке так, чтобы направление ее совпало с линией хода вены и чтобы срез иглы был направлен вверх, к голове. Иглу вкалывают под острым углом – в 20–30°. При попадании в вену из иглы вытекает кровь.

Кровь должна стекать по стенке пробирки по избежании разрушения эритроцитов и при необходимости немедленно смешиваться с достаточным количеством антикоагулянта.

Перед извлечением иглы из вены резиновый жгут снимают, пережимают вену пальцем выше места вкола, иглу извлекают, а место вкола некоторое время сдавливают тампоном для предотвращения образования гематомы. В заключении область венепункции дезинфицируют дезинфицирующим раствором.

Устоявшаяся методика взятия крови у крупного рогатого скота:

Кровь берут из vena jugularis (яремная вена);

Место, где предполагается произвести прокол, дезинфицируют спиртом или 5% раствором йода;

Для взятия крови животное фиксируют – привязывают голову животного;

Большим пальцем нажимают на вену в нижней трети шеи. Задержка оттока крови вызывает набухание вены в виде толстого шнура;

Кровопускательную иглу вводят под острым углом по направлению к голове, продвигая в полость сосуда приблизительно на 1 см;

Кровь в пробирку набирают по стенке.

Кроме того, необходимо готовить посуду, добавлять антикоагулянт для анализов на общую гематологию, выделять сыворотку и удалять сгусток для анализов, требующих получения сыворотки. Но данная методика имеет ряд серьёзных недостатков:

1. Кровь набирается через кровопускательную иглу самотёком в открытую пробирку . Это очень часто приводит к разбрызгиванию крови, в связи, с чем возрастает риск инфицирования животных и человека. Некоторые ветеринарные специалисты использовали одноразовые шприцы, но это не избавляло от необходимости переливать кровь в открытую пробирку. Если нужна была не сыворотка, которая выделяется в стеклянной пробирке (но не в пластиковой), а цельная кровь, то нужно было вручную отмерять необходимый для исследований объём крови и затем вручную добавлять нужное количество реагентов (где также возможны были ошибки в дозировке). К тому же, переливание крови из одноразового шприца в стеклянную пробирку зачастую приводит к гемолизу, что искажает результаты исследований или делает их невозможными. Также, ошибочным является взятие крови шприцом с последующим переливанием крови в вакуумную пробирку.

2. Набранная самотёком в открытую пробирку, кровь теряет свою стерильность из-за воздействия на неё внешней среды, следовательно, результаты лабораторных исследований могут быть искажены. Стеклянные пробирки закрываются либо нестерильными резиновыми пробками, либо ватными тампонами, что часто приводит к открытию пробирки с разлитием крови.

3. Стеклянные пробирки часто разбиваются – соответственно, нужно не только ликвидировать последствия этого в виде осколков и разлитой крови, но и повторно брать пробу крови у животного.

4. При взятие крови из ярёмной вены необходима фиксация животного , то есть привлечение к процедуре дополнительного персонала, с соответствующими затратами труда, нервов, времени и финансов.

5. Жёсткая фиксация, а также боль при взятии крови толстостенными кровопускательными иглами большого диаметра вызывает стресс у животных . В случае с крупным рогатым скотом это приводит к неизбежному снижению надоев молока до 1 л в день в течение нескольких дней. На 1000 голов убытки от падения надоев могут составлять до 35 тысяч тенге (кстати, одна только эта сумма значительно превышает стоимость вакуумных систем для взятия крови, необходимых для взятия крови у 1000 голов).

6. Грубая фиксация приводит к массовому перезаражению лейкозом ранее здоровых животных , через травмированную слизистую оболочку носовой полости.

Новый метод взятия крови у крупного рогатого скота

Для взятия проб венозной крови наиболее предпочтительно использовать вакуумсодержащие системы. Этот способ имеет ряд преимущес тв, основным из которых является то, что кровь попадает непосредственно в закрытую пробирку, предотвращающую любой контакт ветперсонала с кровью животного.

Речь идёт не только об упрощении процедуры взятия крови, что само по себе немаловажно, но и о значительном снижении процента преаналитических ошибок, увеличении безопасности процедуры, снижении риска заражения скота, сохранения уровня надоев после процедуры и отсутствия осложнений у животных после взятия крови.

Вакуумсодержащая система представляет собой закрытую двухкомпонентную систему - вакуумный шприц-контейнер и специальную иглу. Выделение сыворотки или соединение крови с антикоагулянтом происходит в том же объёме шприца, в который берётся кровь, то есть после взятия крови сам шприц является транспортной пробиркой с антикоагулянтом или сывороткой.

Под действием вакуума кровь втягивается через иглу вакуумной системы напрямую из вены в пробирку и сразу же смешивается с химическим реактивом. Тщательно дозированный объем вакуума обеспечивает точное соотношение кровь/реагент в пробирке.

На основе возможностей вакуумной системы для взятия венозной крови Monovette был разработан новый метод взятия крови у крупного рогатого скота:

Кровь берут из vena с occygea (хвостовая вена).

Для взятия крови животное не фиксируют.

Хвост животного берут рукой в области средней трети и медленно поднимают вверх.

Место взятия крови, область 2-5 хвостовых позвонков, дезинфицируют спиртом или 5% раствором йода.

Кровь берут в средней трети тела 2-5 хвостовых позвонков, находящейся на линии, идущей вдоль хвоста и делящей его на 2 симметричные части.

Иглу вводят под углом 90° до упора на глубину 5-10 мм.

Преимущества взятия крови вакуумными системами Monovette из хвостовой вены:

Сокращение времени взятия крови ветврачом (до 200 животных за 2 часа)

Отсутствие фиксации животного;

Исключение контакта ветврача с кровью на всех этапах взятия и транспортировки крови;

Предупреждение распространения инфекций через кровь и загрязнения (контаминации) объектов окружающей среды; (особенно актуально при лейкозе КРС)

Минимизация осложнений и стресса у животных;

Отсутствие сокращения надоев в результате стресса и осложнений

Возможность получения стерильной крови.

Эти преимущества делают применение ваууумных систем для взятия крови в ветеринарии перспективной технологией, позволяющей быстро, качественно и безопасно решать проблему массового взятия крови у поголовья. Сохранение надоев и отсутствие осложнений – являются показательным экономическим аргументом необходимости повсеместного внедрения современной методики.

Приборы для взятия крови у крупного рогатого скота .

1. Вакуумные системы для взятия венозной крови у крупного рогатого скота.

Вакуумные системы для взятия венозной крови имеют преимущества, более чем достаточные для того, чтобы навсегда забыть о прежней методике взятия крови.

Состоит вакуумная система из трёх компонентов:

Двусторонняя игла - резьбовая, либо автоматическая (разной длины и диаметра).

Иглодержатель - резьбовой, либо автоматический.

Вакуумная пробирка.

Пробирка стерильна, герметична, изготовлена из небьющегося биологически инертного пластика (полиэтилентерефталат), не влияющего на результаты исследований.

Пробирки содержат реагент, распылённый по стенкам:

для получения сыворотки используется активатор свёртывания (кремниевое напыление, активирующее образование сгустка крови и выделение сыворотки);

для получения цельной крови используется антикоагулянт К2 ЭДТА (Трилон Б).

В пробирку не надо вручную добавлять реагенты – после забора крови вакуумную пробирку (как с крышкой, так и без неё) можно центрифугировать и помещать в анализатор.

Пробирки могут быть с разным объёмом вакуума (следовательно, и объёмом забираемой крови) – от 2 до 10 мл. Самые востребованные объёмы – 9-10 мл (для крупного рогатого скота, свиней, лошадей). Для мелких животных можно использовать пробирки на 2, 3, 4 мл.

Преимущества вакуумных систем в сравнении с обычными иглами и пробирками:

1. Двусторонние иглы с лазерной заточкой среза легко входят в вену, не вызывая сильных болезненных ощущений . Если кровопускательные или инъекционные иглы применяются диаметром 1,2 мм (18G), то двусторонние иглы вакуумных систем можно использовать диаметром 0,9 мм (20G) – так как эти иглы тонкостенные, то при меньшем внешнем диаметре иглы, её внутренний диаметр не уступает в пропускной способности иглам с толщиной 1,2 мм. Внешняя и внутренняя поверхности иглы обработаны силиконом, поэтому кровь свободно течёт в пробирку, не вызывая тромбирования иглы. Резиновый клапан на дистальном конце иглы предотвращает разбрызгивание крови в момент нахождения иглы в вене при отсутствии пробирки. Благодаря этому, можно набрать кровь в несколько пробирок, не вынимая иглы из вены - одна пробирка вынимается из иглодержателя, и вставляется другая пробирка для забора новой пробы крови (если необходимо взять кровь сразу на несколько видов исследований).

2. Сохраняется герметичность системы во время взятия пробы, кровь остаётся стерильной и не разбрызгивается, что исключает возможность перекрёстного инфицирования.

3. Вакуумная пробирка сделана из небьющегося материала. Не нужно собирать осколки стеклянных пробирок и убирать разлитую кровь (возможно инфицированную).

4. Сокращается время свёртывания крови в пробирке . Благодаря активатору свёртывания (кремниевое напыление) сыворотка выделяется за 20-30 мин.

5. Проба крови набирается в вакуумную пробирку, в ней же транспортируется в лабораторию, в ней же центрифугируется и в ней же исследуется в анализаторе. То есть, отпадает необходимость переливания крови из одной пробирки в другую.

2. Monovette - шприц-пробирка с иглой для взятия крови одноразового применения в ветеринарии.

Monovette - это технологическая новинка, которая совсем недавно появилась на рынке медицинских изделий. Вакуумный шприц-контейнер со специальными иглами предназначен для взятия венозной крови как шприцевым способом, так и вакуумным. Шприц-контейнер приспособлен для хранения и транспортировки крови.

Основные особенности системы Monovette.

Шприц-контейнер сделан из ударопрочного пластика, устойчивого к низким температурам, экологически безопасного. Внутри контейнера имеется реагент. Игла имеет диаметр 0,9 мм, благодаря чему отсутствую осложнения после взятия крови. Гладкие края иглы минимизируют повреждения клеток крови (гемолиз). Оптимальный угол заточки иглы, предотвращает «забивание» и тромбирование иглы.

Интернет-ресурсы:

http://aptekacentr.com

http://ordamed.kz

http://rts-engineering.ru

http://1uilim.e-stile.ru

http://agropost.ru

На сегодня решил сделать еще один пост. И будет он посвящен самому трудоемкому, и самому массовому процессу в нашей ветеринарной жизни - это взятие крови у коров для диагностических исследований, таких как например: лейкоз, бруцеллез, лептоспироз и т. д., и для биохимического исследования в осенне-весенний период.

Наши дедушки с бабушками ветеринарной службы брали кровь традиционно, да и сейчас до сих пор так учат в наших ветеринарных ВУЗах - из яремной вены. Но наука и технологии не стоят на месте. Прогрессивные умы человечества постоянно работают над совершенствованием новых способов работ, стороной не обошло и ветеринарное направление.

Всех нас учат в институтах ветеринарии, что кровь нужно брать из яремной вены, в многоразовую стеклянную пробирку, используя многоразовую металлическую иголку разного диаметра.

Взятие крови в стеклянную пробирку

Как видно на верхнем фото, чтобы взять кровь, нужно во-первых зафиксировать животное, наложить на шею резиновый жгут (он нужно чтобы лучше определялась яремная вена). Далее нужно с размаха попасть в вену, пробив кожу моментально. И только потом подставлять пробирку. В чем сама неудобность - затрата времени, средств, сил, рабочей силы.

Но как выше писал я уже, человечество не стоит на месте, и постоянно совершенствует свои подходы к работе, попутно облегчая их.

Не так давно, а именно, в 2000-х годах к нам приехали иностранцы, и рассказывали о том что мы тут древние, ничего не знаем, и будем вас учить. И действительно, показали как нужно брать кровь у коров по современным стандартам. А именно, в вакуумную пробирку одноразового использования (см. фото ниже )

взятие крови у коровы из хвостовой вены в вакуумную пробирку

Скажу сразу, сейчас до сих пор есть противники такого метода - метода взятия крови из хвостовой вены, они считают, что является классикой, то не умирает никогда, ну как по Ленину.

Хотя, как вы можете видеть на фото, маленькая вакуумная пробирка, нет лишней или даже дополнительной фиксации животного(!) что очень важно для проведения зооветеринарных мероприятий. На такую процедуру взятия крови уходит максимум полминуты-минута, в то время, как при старом методе взятия крови, иногда уходит и до десяти минут!
Следующий фактор который нужно отнести в плюс - человек не контактирует с кровью, а значит риск заболеть лейкозом или бруцеллезом он минимален, или вообще исключен
Следующий фактор - кровь под вакуумом сама идет в пробирку, и занимает это секунды.
Следующий фактор - животное спокойнее стоит, когда у нее кровь берут из хвостовой вены, нежели их яремной вены.
Следующий фактор - кровь не попадает во внешнюю среду и на объекты внешней среды (подстилка, кормушка, поилка и т.д.) - это я указал в аспекте, если животное может быть больным лейкозом, бруцеллезом и т. д.
Следующий фактор - стоимость одной пробирки вместе с иголкой одноразовой 8 рублей. Да и не так часто приходится брать кровь - один-два раза в год (массово при ветеринарных обработках), да и в текущем плане - при биохимическом исследовании крови у коров. Раньше нужно было: намыть стеклянных пробирок ну грубо говоря пробирок 600-1000, затем их прокипятить, затем уложить, потом после того как слили кровь их снова помыть и так все по кругу. Да и бьются они часто, и травмирование ветеринарного работника и самого животного тоже часто бывает.
Следующий фактор - Не надо переливать кровь, после того как она отстоится. Сразу поставили в специальный планшет и отправляем в лабораторию.
Следующий фактор - подписывать нужно саму пробирку, и это очень удобно, в то время, как раньше это было очень трудоемко (нужно было нарезать специальные резиночки, потом одеть их на стеклянные пробирки, затем когда кровь возьмут подписать, а если нет резиночки, то бумажку заворачивали в ватку и сверху вводили в стеклянную пробирку).

Ну вот, вроде все рассказал, и это будет не последний мой пост. Очень много интересного вас ждет впереди!

В своей практической деятельности ветеринарным специалистам при выполнение плана противоэпизоотических мероприятий, а также при исключении тех или иных инфекционных заболеваний приходится проводит взятие проб крови от животных. При этом у лошадей, крупного рогатого скота, верблюдов, оленей, овец и коз кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи. Иглы для взятия крови обязательно стерилизуются кипячением . Кровь берется от каждого животного отдельной иглой . В последние годы забор крови от животных проводится вакуумными пробирками или одноразовыми шприцами из подхвостовой вены.

1. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригается, кожа дезинфицируется 70% спиртом.

2. При взятии крови специалист должен следить, чтобы кровь стекала по стенке пробирки струей, а не каплями. Кровь, взятая каплями и вспененная, скорее гемолизируется и часто дает неправильные результаты показаний при исследовании. Во время взятия крови ветспециалист должен следить, чтобы кровь не попадала в кормушку и на землю . Для этого ветспециалист при взятие крови из вены должен пользоваться тазиком с дезинфицирующей жидкостью, куда спускают первую порцию крови.

У свиней кровь берется из уха (иглой или шприцем) или из кончика хвоста. Хвост перед взятие крови обмывают водой с мылом и дезинфицируют 70% спиртом, затем кончик отрезают ножницами. После взятия крови кончик хвоста обрабатывают йодом, перевязывают или прижигают.

У птиц кровь берут из вены крыла или гребешка. Брать кровь надо по возможности утром, до кормления животного.

3. Объем: Для серологического исследования от крупных животных кровь берут в количестве 7-10мл, а от мелких животных в объеме 2-4мл.

4. Взятую кровь выдерживают около часа при температуре 30-35 градусов для свертывания, а затем выносят в прохладное помещение для отстаивания .

5. Сроки доставки: сыворотка крови должна быть доставлена в ветлабораторию, в течение первых суток. И в исключительных случаях не позднее третьего дня после ее взятия!!!

6. При пересылке сыворотки на большое расстояние, особенно летом ее необходимо консервировать 5%-ным раствором карболовой кислоты на физиологическом растворе из расчета на каждые 9мл сыворотки 1мл раствора карболовой кислоты или 1-2капли раствора на 1мл сыворотки.

Сыворотку можно консервировать также высушиванием. Для высушивания сыворотку наносят на фильтровальную бумагу размером 5*5см в количестве 0,4мл и выдерживают в комнате при рассеянном свете до полного высыхания . После этого на каждой бумаге с высушенной сывороткой делают соответствующие записи карандашом и завертывают в пергаментную бумагу (каждую пробу отдельно), а затем упаковывают в конверт и в таком виде отсылают в лабораторию.

7. Для серологического исследования в лабораторию особенно от вблизи расположенных хозяйств можно отправлять и цельную кровь, не отделяя сыворотку, но при условии, что в пути ее не будут встряхивать и она не подвергнется гемолизу.

8. Маркировка: на каждой пробе сыворотки крови или крови указывают ее порядковый номер, инвентарный номер животного (кличку животного, фамилию владельца животного).

9. Оформление: к сопроводительному письму на пробы крови, направляемые в плановом порядке для серологического или гематологического исследования, прилагается опись проб в 2-х экземплярах. Смотри приложение №1. (doc)

10. Упаковка и транспортировка: Пробирки с кровью или сывороткой плотно закрывают стерильными пробками и устанавливают для пересылки в строго вертикальном положении (на лицевой стороне посылки вверху должна быть надпись «осторожно-стекло!» и «Верх») . Зимой кровь и сыворотку упаковывают и пересылают так, чтобы они не замерзали .

Очень популярным в последнее время стало такое направление животноводческого хозяйства, как разведение крупного рогатого скота. Это можно объяснить тем, что коровы дают человеку необходимую продукцию (мясо, молоко, сметану, кожу и др) .

В основе разведения любых животных лежит получение здоровых и полноценных особей, но этого мало. За животными надо ухаживать и следить за показателями их здоровья. С этой целью необходимо систематически проводить ветеринарный осмотр животного. Во время этого осмотра врач может выявить какую либо патологию или возможность ее дальнейшего развития.

Для более точного определения состояния животного необходимо взять у него кровь и сделать ее анализ по разным показателям. Кровь КРС может рассказать о различных нарушениях, происходящих в организме животного, или же, наоборот, о нормальной жизнедеятельности организма.

В последнее время наблюдается процесс интенсификации в области медицины и ветеринарии. В связи с этим появились вакуумные системы для забора крови, которые позволяют избежать контакта человека с кровью животного. Это обеспечивает безопасность.

Взятие крови у КРС - это процесс, к которому необходимо подходить очень ответственно. Забор крови у КРС можно осуществлять тремя способами. Во-первых, кровь берут из ярёмной вены. Этот процесс осуществляют специальным прибором, который состоит из трубчатого корпуса, один конец которого заглушен, а во второй - вставлен коннектор с иглодержателем, параллельным оси симметрии корпуса. В коннекторе имеется канал, соединяющий иглодержатель с полостью корпуса.

Этот канал находится под углом 25 градусов к оси симметрии корпуса, полость которого соединена с атмосферой при помощи дренажного канала. Этот способ имеет ряд недостатков: кровь при помощи такого прибора можно брать только в определенном положении (может быть неудобно из-за морфологических особенностей животного, брать должен специально обученный человек, чтобы качество крови, взятой на анализ, было хорошим) .

Во-вторых, кровь можно брать из молочной вены. У этого способа тоже есть недостаток: кровь можно брать только у взрослых коров, т. к. молочная вена формируется не сразу. Кроме того, одному человеку взять кровь невозможно, кто-то еще должен помогать фиксировать животное в определенном положении. В-третьих, кровь можно брать из хвостовой вены. При заборе крови корова должна быть привязана, в фиксации необходимость отсутствует. Забор крови осуществляется при помощи специальной вакуумной системы или одноразового шприца.

Надо своевременно реагировать на отклонения показателей анализа крови от нормы, т. к. они очень опасны для животного. Например, недостаток лейкоцитов говорит о снижении иммунитета животного, которое в такой период более восприимчиво к разным инфекциям.

При проведении анализа учитывается морфология и биохимия крови КРС. Морфологический и биохимический анализ крови КРС включает в себя определение количества эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, холестерина, глюкозы, фосфора, железа и др. микроэлементов, а также витаминов, белков, альбуминов, альфа-, бета- и гамма-глобулинов.

Отклонения этих показателей от нормы говорит о различных нарушениях в организме животного. Определение точного количества этих показателей очень важно, поэтому необходимо осуществлять качественный забор крови у КРС. Это позволяет существенно повысить точность результатов анализов.

Для контроля за состоянием организма животного необходим анализ крови, в котором будут отражены морфологические и биохимические показатели крови КРС. Отклонения этих показателей от нормы говорят о нарушениях в организме животного и позволяют поставить диагноз.

кровь животное лейкоцит гемоглобин

Условия взятия крови и ее сохранность до начала лабораторных исследований имеют важное значение при получении достоверных результатов. Во многом эти результаты зависят от техники взятия крови и используемых при этой инструментов. В организме различает артериальную, венозную и капиллярную кровь, которая имеет незначительные цитологические и биохимические отличия. Для морфологических исследований пользуются почти исключительно капиллярной кровью, а при биохимических - венозной.

Капиллярную кровь берут из внутренней поверхности ушной раковины. Шерсть на месте взятия крови выстригают, очищают место укола ватным тампоном, смоченным спиртом-эфиром. Укол делают на глубину до 2 мм. Первую каплю крови стирают, т.к. она содержит случайные примеси и лимфу, а последующие берут для исследования. Очень важно, чтобы кровь вытекала из ранки без надавливания на ткани, иначе она смешивается с лимфой и изменяет свой клеточный и биохимический состав. Истечение крови можно ускорить, если предварительно прогревать место укола в теплой воде или источником сухого тепла (фен, электролампа).

При венепункции прокол окружающих вену тканей и стенки вен делают в один прием. Иглы для взятия крови должны быть с коротким срезом и достаточно большим диаметром, чтобы не травмировать противоположную стенку вены и не вызвать повреждения эритроцитов. Предварительно иглы стерилизуют кипячением в 1%-ом растворе бикарбоната натрия, место вкола обрабатывают аналогично получению капиллярной крови.

При взятии крови из яремной вены иглу вкалывают на границе перехода верхней трети шеи в среднюю. Чтобы вызвать достаточное наполнение вены и уменьшать ее подвижность, вену сдавливает в середине шеи резиновым жгутом или пальцем. При проколе вены необходимо держать иглу в руке так, чтобы направление ее совпало с линией хода вены и чтобы срез иглы был направлен вверх, к голове. Иглу вкалывают под острым углом - в 20-30°. При попадании в вену из иглы вытекает кровь.

Кровь должна стекать по стенке пробирки по избежании разрушения эритроцитов и при необходимости немедленно смешиваться с достаточным количеством антикоагулянта.

Перед извлечением иглы из вены резиновый жгут снимают, пережимают вену пальцем выше места вкола, иглу извлекают, а место вкола некоторое время сдавливают тампоном для предотвращения образования гематомы. В заключении область венепункции дезинфицируют настойкой йода и заливают Колодием .

В зависимости от характера исследований готовят определенное количество пробирок. Стенки стеклянной посуды способны обмениваться ионами с кровью, а следы моющих средств и поврежденные пробирки влияют на активность, ферментов. Это можно исключить, если использовать пластмассовые, пробирки одноразового пользования; для некоторых исследований стенки стеклянных пробирок покрывают слоем парафина или силиконового масла.

В зависимости от задач исследования анализу подвергают цельную кровь, плазму или сыворотку.

В цельной крови определяют морфологические показатели, а также содержание глюкозы, кетоновых тел, меди, цинка, кобальта, марганца, селена и др., т.е. веществ, равномерно распределенных между плазмой и эритроцитами. Для исследования веществ, неравномерно распределенных между клетками и жидкой частью крови, следует использовать сыворотку или плазму. В сыворотке, например, исследуют общий белок и его фракции, остаточный азот, мочевину, свободные аминокислоты, липиды, холестерин, билирубин, кальций, неорганический фосфор, магний, йод, связанный с белком (СБЙ), каротин, витамины, ферменты и др. В плазме - резервную щелочность, содержание натрия, калия, неорганического фосфора, магния, каротина, витаминов А, С и др.

Для получения пробы цельной крови или плазмы ее стабилизируют, т.е. в пробирку вносят противосвертывающее вещество - антикоагулянт. Антикоагулянты лучше применять в виде растворов.

Для получения сыворотки пробирки с кровью рекомендуется в процессе взятия крови помещать в термостат с температурой до 38°С. При массовых обследованиях животных таким импровизированным термостатом может быть достаточная емкость с водой указанной температуры. После завершения работ по взятию крови, свернувшиеся пробы обводят тонкой спицей из нержавеющей стали для лучшего отделения сыворотки и ставят в термостат при 37-38°С на 1-2 часа для окончательного отделения сыворотки. Сыворотку сливают и центрифугируют 20 минут при 2000-3000 об/мин.

Для получения плазмы кровь с антикоагулянтом центрифугируют 20-30 минут при 2000-3000 об/мин. Плазма крови отличается от сыворотки наличием фибриногена.

Цельную кровь, плазму и сыворотку для непродолжительного хранения помещают в холодильник (+2…+4°С), длительное хранение сыворотки требует температуры - 20°С.

Нарушение условий хранения проб может стать причиной погрешностей анализа. В результате длительного стояния сыворотки, над эритроцитами могут наступить сдвиги в концентрации ряда компонентов: повышается концентрация калия, активности кислой фосфатазы, аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, гидроксибутиратдегидрогеназы, понижается содержание глюкозы вследствие гликолитических процессов. При температуре около 20°С в цельной крови возрастает содержание аммиака, многие ферменты даже при температуре холодильника быстро теряют свою активность (креатинкиназа, кислая фосфатаза), в лактатдегидрогеназа, напротив, быстрее теряет активность при низких температурах .

Возникший при взятии или хранении гемолиз эритроцитов приводит к повышению концентрации калия, активности кислой фосфатазы, аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, гидроксибутиратдегидрогеназы. Неумелое встряхивание проб при перемешивании их содержимого или при транспортировке также может вызвать гемолиз эритроцитов.

При проведении специальных исследований нужно внимательно следить за выполнением особых, оговоренных в описании методик правил взятия, консервации и хранения проб крови .